EFEITOS DO TRATAMENTO COM SILDENAFIL SOBRE CÉLULAS TRONCO HEMATOPOIÉTICAS DE CAMUNDONGOS HIPERTENSOS
Nome: THAÍS DE ANDRADE JACINTO
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 16/12/2016
Orientador:
Nome |
Papel |
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| SILVANA DOS SANTOS MEYRELLES | Orientador |
Banca:
| Nome |
Papel |
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| FABIANA DAYSE MAGALHAES SIMAN MEIRA | Examinador Externo |
| MARCELO PERIM BALDO | Examinador Interno |
| SILVANA DOS SANTOS MEYRELLES | Orientador |
Resumo: A hipertensão arterial sistêmica (HAS) é uma condição clínica multifatorial caracterizada por níveis elevados e mantidos de pressão arterial. Esta condição está associada aalterações funcionais e/ou estruturais dos órgãos-alvo, como por exemplo, coração, encéfalo, rins e vasos sanguíneos; e também as alterações metabólicas, que aumentam o risco de disfunções cardiovasculares fatais e não fatais.O modelo clássico de hipertensão renovascular, 2 rins-1 clipe (2R1C), foi desenvolvido por Goldblatt em 1934, onde mostrou uma elevação substancial da pressão arterial de cães, este modelo patogênico serviu e serve como base para estudos subsequentes de hipertensão renovascular. Nosso laboratório tem mostrado que esta hipertensão é acompanhada de níveis elevados de estresse oxidativo, o qual é um fenômeno complexo definido como o excesso de espécies reativas de oxigênio (ROS) resultante do aumento de sua produção ou da diminuição de sua degradação.As ROS desempenham papéis fisiológicos importantes uma vez que estão envolvidas em diversas funções celulares, como defesa contra patógenos, expressão gênica, senescência, apoptose e regulação do crescimento celular em diversos órgãos.Torna-se importante também estudar neste modelo a funcionalidade das células tronco, as quaispossuem uma imensa responsabilidade sobre a manutenção tecidual e na homeostase do organismo. Todo o sistema hematopoiético é gerado a partir de células-tronco hematopoiéticas (CTHs) que possui uma grande longevidade e um enorme potencial para auto renovação. Nossa proposta também visa investigar neste modelo de hipertensão o efeito dosildenafil, o qual é uma droga vasoativa amplamente utilizada no tratamento de disfunção erétil e hipertensão pulmonar. Ele é um inibidor potente e seletivo da fosfodiesterase tipo 5 (PDE5). O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do tratamento com sildenafilsobre a produção citoplasmática de espécies reativas de oxigênio (ROS) em células-tronco hematopoiéticas de camundongos com hipertensão renovascular.A hipertensão renovascular foi induzida pela colocação de um clipe de aço ao redor da artéria renal esquerda de camundongos machos (C57BL/6),pesando 23 g. Duas semanas após a indução da hipertensão, os animais foramaleatoriamente divididos em dois grupos: tratados com sildenafil[40 mg/kg/dia (VIAGRA), Pfizer, São Paulo, Brasil], via oral(Sil, n=10) ou veículo (2R1C, n= 10) por 2 semanas e comparados com o grupo controle (Sham, n= 10). Ao final do tratamento, os animais foram eutanasiados; rins e coração foram removidos para determinação de seus pesos e normalizados em relação ao comprimento da tíbia. As CTHs foram isoladas da medula óssea a partir de fêmures e tíbia. As célulastronco foram identificadas, quantificadas e análises da produção de radicais livres, apoptose e ciclo celularrealizadas. Os dados estão expressos como média±EPM. A análise estatística foi realizada por meio de ANOVA de uma via, seguida de post hoc de Tukey.Nossos dados indicam que animais hipertensos tiveram um aumento da produção de ânion superóxido e que o tratamento com sildenafil reverteu essa produção (Sham 1531±206 vs. 2R1C 1973±337* vs.Sil 1483±192#). Os níveis de peróxido de hidrogênio que também estavam aumentados tiveram sua produção diminuída com o tratamento com sildenafil(Sham 3805±237 vs. 2R1C 6562±456* vs.Sil 4447±395#&).As espécies altamente reativas de oxigênio foram diminuídas com o tratamento(Sham 1653±303 vs. 2R1C 2529±196* vs.Sil 1611±252#). O número de células presentes na medula óssea caiu drasticamente nos animais hipertensos, mas essa situação foi revertida com o sildenafil (Sham 4,5x106±1,1 vs. 2R1C 2,4x106±0,7* vs.Sil 6,3x106±1,7#). O número de CTHs que sofreram apoptose também diminuíram com o tratamento, tendo uma melhora significativa inclusive comparado ao grupo controle, aumentando assim o número de células viáveis (Sham 59,3%±7,8 vs. 2R1C 46,7%±6* vs. Sil 80%±4,9#&). Considerando a importância das células-tronco para a homeostase do organismo,nossos dados nos levam a sugerir osildenafil como uma opção para o tratamento de CTHsprejudicadas pela hipertensão renovascular.
