ALTERAÇÕES CARDIOVASCULARES INDUZIDAS PELA PEÇONHA DA SERPENTE BOTHROPS LEUCURUS

Nome: GUSTAVO BAPTISTA NAUMANN
Tipo: Tese de doutorado
Data de publicação: 05/04/2018
Orientador:

Nomeordem decrescente Papel
Suely Gomes de Figueiredo Orientador

Banca:

Nomeordem decrescente Papel
MARCIA HELENA BORGES Examinador Externo
Nazare Souza Bissoli Examinador Interno
Rita Gomes Wanderley Pires Examinador Externo
Sonia Alves Gouvea Examinador Interno
Suely Gomes de Figueiredo Orientador

Resumo: Bothrops leucurus (jararaca-do-rabo-branco) é a principal espécie causadora de acidentes ofídicos na região Nordeste do Brasil e norte do Espírito Santo. Diversos estudos têm investigado as características bioquímicas da peçonha dessa serpente, bem como seus efeitos locais. Entretanto, efeitos sistêmicos como os cardiovasculares têm sido pouco explorados. O objetivo do presente trabalho foi investigar as atividades
cardiovasculares agudas induzidas pela peçonha de B. leucuros (BlV) "in vivo" e em "in vitro". Em ratos anestesiados foi demonstrado que BlV (10-100μg/kg), induz hipotensão imediata e transiente, a resposta máxima foi observada em 5 min e houve um retorno a valores basais em ≈ 20 minutos. Os animais não apresentaram alteração na frequência
cardíaca. Os efeitos in vitro foram avaliados em anéis de artéria mesentérica précontraídos com fenilefrina utilizando um miógrafo de resistência. Foi demonstrado que BlV (1-20 μg/mL) causa vasodilatação dose dependente nestes vasos, atingindo a resposta máxima em ≈ 10 minutos, com recuperação progressiva após 15 minutos. Um
menor relaxamento do vaso foi observado em vasos sem endotélio, demonstrando que além do músculo liso vascular o endotélio também participa desta resposta. O prétratamento dos animais e/ou dos vasos com inibidores de vias envolvidas nestas repostas - indometacina (inibidor da ciclooxigenase), L-NAME (inibidor da óxido nítrico
sintase), heparina (inibidor indireto da trombina), atropina (antagonista muscarínico), PMSF (inibidor de serinoprotease) e EDTA (inibidor de metaloprotease) - mostrou que somente a indometacina foi capaz de reduzir a resposta cardiovascular induzida pela BlV (50 μg/kg). Este inibidor foi capaz de bloquear ≈ 45% e ≈ 77% das alterações nas
pressões sistólica e diastólica e ≈ 30% do relaxamento vascular induzido pela BlV, sugerindo a participação dos metabólitos do ácido araquidônico nessas respostas. Um componente proteico que reproduz os efeitos cardiovasculares observados foi purificado por duas etapas cromatográficas (Troca iônica e Fase reversa). Análises por
espectrometria de massas - MALDI-ToF e MALDI-ISD - revelaram que a proteína com atividade cardiovascular apresenta massa molecular (MW) de 13.889,975 Da e identificaram uma sequência interna de 27 resíduos de aminoácidos. Essa MW corresponde à da fosfolipases blD-PLA2 já purificada da peçonha de B. leucurus, e a sequência identificada apresenta 100% de identidade com os resíduos 10 ao 36 -
cobertura de 22% dessa molécula. Estes dados permitem inferir que a proteína purificada é a blD-PLA2. Neste trabalho foi demonstrado que a peçonha da B. leucurus induz vaso relaxamento e consequentemente hipotensão imediata após o envenenamento, e parte destes efeitos são acarretados pelo aumento da liberação de prostanóides vasodilatadores pela atividade esterásica da blD-PLA2. Estes dados sugerem a participação dos metabólitos do ácido araquidônico nessas respostas. Um componente proteico que reproduz os efeitos cardiovasculares observados foi purificado por duas etapas cromatográficas (Troca iônica e Fase reversa). Análises por espectrometria de massas - MALDI-ToF e MALDI-ISD - revelaram que a proteína com atividade cardiovascular apresenta MW de 13.889,975 Da e identificaram uma sequência interna de 26 resíduos de aminoácidos. Essa MW corresponde à da blD-PLA2 já purificada da peçonha de B. leucurus, e a sequência identificada apresenta 100% de identidade com os resíduos 11 ao 36 - cobertura de 21% dessa molécula. Estes dados permitem inferir que a proteína purificada é a blDPLA2. Neste trabalho foi demonstrado que a peçonha da B. leucurus induz vaso relaxamento e consequentemente hipotensão imediata após o envenenamento, e parte destes efeitos são acarretados pelo aumento da liberação de prostanóides vasodilatadores pela atividade esterásica da blD-PLA2.

Acesso ao documento

Acesso à informação
Transparência Pública

© 2013 Universidade Federal do Espírito Santo. Todos os direitos reservados.
Av. Marechal Campos, 1468 - Bonfim, Vitória - ES | CEP 29047-105