Efeito do aceturato de diminazeno em SHR: potenciais vias e mecanismos para a terapêutica antihipertensiva.

Resumo: A hipertensão arterial (HA) constitui importante problema de saúde pública. A prevalência de HA no Brasil situa-se em 30% (população adulta) e este índice pode aumentar nas próximas décadas em função da pandemia de obesidade e envelhecimento da população. Apesar da melhoria dos tratamentos da doença nas últimas décadas, cerca de 10 a 15% dos hipertensos não conseguem normalizar a pressão, mesmo com tratamento otimizado com até 4 drogas antihipertensivas caracterizando-se o que se denomina ‘hipertensão resistente’. Esse dado reforça a necessidade de ampliar estudos para descobrir novos alvos terapêuticos no tratamento da doença e prevenção de suas consequências, como a cardiomiopatia hipertensiva. Um alvo a ser explorado neste projeto é a via enzima conversora de angiotensina-2 (ECA2)/angiotensina 1-7/receptor Mas, a qual contrabalança a via clássica do SRA (angiotensina II-receptor AT1), pois induz vasodilatação e queda da pressão arterial. Ademais, foi descrita que a ECA2 pode promover a conversão de angiotensina A à Alamandina, que via receptor MrgD representa via protetora dentro do SRA. Estas novas vias, no coração, reduzem a hipertrofia e atenuam a fibrose reativa. A fibrose cardíaca tem uma importância crucial na hipertensão, pois constitui uma das principais causas da redução da complacência ventricular, disfunção diastólica e evolução para insuficiência cardíaca. O objetivo do presente estudo será determinar o potencial terapêutico de uma droga que ativa a ECA-2 (aceturato de diminazeno-DIZE) e que potencialmente aumentaria os níveis circulantes de Ang-(1-7). Estudos prévios em nosso laboratório mostraram efeito hipotensor agudo do DIZE em ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Neste projeto será dado seguimento a esta linha de pesquisa buscando-se caracterizar o efeito do composto por via oral e explorar os mecanismos deste efeito hipotensor. Ratos SHR e seus respectivos controles (Wistar Kyoto) serão tratados por via oral (4 semanas) com DIZE (1,5; 5 e 15 mg/Kg) por gavagem, ou veículo. A PA será monitorada por plestimografia de cauda (basal, 14 e 28 dias). O volume urinário e ingestão de água serão avaliados em gaiola metabólica 3 dias antes do final do tratamento. A função hemodinâmica será determinada por cateterismo, ao final do protocolo, da artéria carótida comum esquerda, e no dia seguinte será feito o registro das pressões sistólica, diastólica e frequência cardíaca com o animal acordado. Em seguida será feito o cateterismo cardíaco sob anestesia para aferição da pressão diastólica final, pressão de pico e dP/dt máximo positivo e negativo do ventrículo direito e esquerdo. Ao final do experimento será obtida a curva pressão-volume do VE no coração parado em diástole para determinação da rigidez da câmara ventricular. Em seguida, os corações serão, em parte, fixados em formalina e incluídos em parafina e em outra parte congelados a -80oC para posterior análises bioquímicas. A hipertrofia dos cardiomiócitos e a fibrose cardíaca intersticial e perivascular serão avaliadas em cortes histológicos (picrosirius + HE). A avaliação da reatividade vascular será feita por curvas realizadas em artérias mesentéricas de resistência isoladas, com curvas cumulativas de acetilcolina, nitropurusiato e angiotensina 1-7, após pré-contração com fenilefrina, em presença ou não do endotélio, além da liberação basal de NO pela contração em presença de L-NAME. A análise da expressão proteica, de corações e vasos, será feita por western blot e sua distribuição tecidual será analisada através de imunohistoquímica. Anticorpos serão usados na detecção de proteínas de interesse: ECA2, receptores AT2, Mas e MrgD. Os resultados dos experimentos serão analisados meio de acurado cruzamento entre os dados biológicos e funcionais no intuito de avaliar os efeitos, ainda desconhecidos, do DIZE na cardiomiopatia hipertensiva no modelo SHR, bem como os mecanismos basais envolvidos, ampliando os conhecimentos de base para uma futura perspectiva terapêutica.

Data de início: 01/02/2017
Prazo (meses): 60

Participantes:

Papel	Nome
Coordenador	CARMEM LUIZA SARTORIO